Registro completo de metadatos
| Campo DC | Valor | Lengua/Idioma |
|---|---|---|
| dc.provenance | Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de la UBA | - |
| dc.contributor | Kasper, Lloyd Howard | - |
| dc.contributor | Martin, Valentina | - |
| dc.creator | Martin, Valentina | - |
| dc.date.accessioned | 2018-05-04T21:59:34Z | - |
| dc.date.accessioned | 2018-05-28T16:38:58Z | - |
| dc.date.available | 2018-05-04T21:59:34Z | - |
| dc.date.available | 2018-05-28T16:38:58Z | - |
| dc.date.issued | 2003 | - |
| dc.identifier.uri | http://10.0.0.11:8080/jspui/handle/bnmm/74051 | - |
| dc.description | El Toxoplasma gondii, es un parásito protozoario que infecta al hospedador mediante la ingestión oral de quistes tisulares u ooquistes induciendo una respuesta inmune en el intestino y sistémica del tipo Thl, produciendo inmunidad contra una re-infección. La infección experimental oral de diferentes cepas de ratones resulta en dos modelos interesantes de regulación de la respuesta inmune. Los ratones C57BL/6 (H-2b) desarrollan una ileitis inflamatoria aguda (IBD), caracterizada por la sobreproducción de IFN-γ y la síntesis de óxido nítrico en el intestino delgado dentro de los primeros siete días que, dependiendo de la dosis parasitaria inicial, puede producir la muerte debido al proceso inflamatorio. En cambio los ratones C3H/HeJ y CBA/J (H-2k) muestran solo pequeños procesos inflamatorios, cursando una infección aguda normal con establecimiento de la infección crónica. En el presente estudio, se demuestra que los linfocitos intraepiteliales (IELs) primados con antígeno de T. gondii previenen la ileitis aguda en ratones susceptibles (C57BL/6), e in virro reducen la producción de quemoquinas inflamatorias por enterocitos infectados, evento que estaría mediado por el TGF-β que secretan. Los IELs serían un componente esencial en la homeostasis del intestino luego de la infección oral con este parásito. Como un primer acercamiento en el conocimiento de la respuesta que este parásito genera en ratones que cursan una infección aguda normal, se caracterizó la respuesta de la línea celular enterocítica MODE-K (H-2k)frente a la infección para estudiar su valor como modelo in vitro. Estas células mostraron activarse frente a la infección con taquizoitos del T. gondii, secretando un patrón de citoquinas y quemoquinas cuya cinética resulta cepa específica. Los IELs derivados de los ratones CBA/J mostraron reducir la expresión de quemoquinas en los enterocitos infectados, y este efecto fue observado tanto en IELs no primados como primados. Estos IELs de ratones naïve, a diferencia de los provenientes de ratones susceptibles, producirían citoquinas anti-inflamatorias en forma endógena lo cual podría ser un componente importante en la resistencia al desarrollo de la ileitis aguda frente a la infección. La segunda parte de esta tesis estuvo enfocada al estudio de la habilidad de antígenos específicos del parásito de estimular in vitro una respuesta a nivel sistémico y de mucosas luego de una infección oral de ratones susceptibles (C57BL/6) y resistentes (BALB/c [H-2d) con el fin de evaluar su posible uso en el desarrollo de vacunas. Para esto se usaron formas recombinantes de los antígenos ROP2, GRA4 y TgPI. Los antígenos rROP2 y rGRA4 mostraron inducir una respuesta humoral, e in vitro estimularon una respuesta celular en células de nódulos mesentéricos linfáticos y de bazo del tipo Thl, que resultaron variables según la cepa de ratón que fue infectada. En cambio el antígeno rTgPI genera una baja respuesta inmune durante la infección. Notablemente, la cepa de ratones C57BL/6 produjo altos niveles de IFN-γ y una baja producción de IL-5, mientras que en BALB/c la producción de ambas citoquinas fue menor o nula respectivamente. Estos antígenos fueron utilizados en ensayos de inmunización de ratones de las cepas C57BL/6 y C3H con el fin de estudiar su valor inmunoprotectivo frente a la infección oral cuando se los combina con hidróxido de aluminio como adyuvante. rGRA4 indujo una protección parcial en ambas cepas de ratones, generando una respuesta predominante del tipo Thl mientras que rROP2 confirió protección sólo en la cepa C3H, siendo ésta más importante que rGra4. La inmunización con una mezcla de rROP2 y rGRA4, como con una proteína quimérica rROP2-rGRA4, indujo una protección parcial similar a la obtenida con el antígeno rGRA4 solo (C57BL/6) o rROP2 solo (C3H). Finalmente, el valor inmunoprotectivo de rGRA4 combinado con aluminio fue comparado con el producido por un sistema de vacunas de ADN, obteniéndose valores similares de protección parcial. En otro estudio, rTgPI mostró inducir una inmunidad protectora en ratones C3H tanto a nivel de formación de quistes como ante infecciones letales, sugiriendo una inducción de inmunidad durante la etapa aguda de la infección. Estos resultados sugieren que estos antígenos podrían considerarse buenos candidatos para el desarrollo de una vacuna multi-antigénica basada en aluminio. | - |
| dc.description | Toxoplasma gondii is a protozoan parasite that infects the host by oral ingestion of tissue cysts or oocysts, with the induction of a systemic and intestinal Thl immune response resulting in the production of immunity against re-infection. There are two interesting models of the immune response regulation in the experimental oral infection with cysts of different strains of mice. C57BL/6 mice (H-2^b) develop acute inflammatory ileitis (IBD) characterized by the overproduction of IFN-γ and nitric oxide synthesis in the gut after seven days of infection, and depending on the initial parasite-dose this inflammatory response can result lethal. In contrast, oral infection of C3H/HeJ and CBA/J (H-2^k) reveal only mild inflammation in the gut, resulting resistant to the acute phase of the infection with the establishment of the chronic infection. In the present study, we report that T. gondii antigen-primed intraepithelial lymphocytes (IELs) prevent the acute ileitis in C57BL/6 susceptible mice, and in vitro, reduce the production of inflammatory chemokines by infected enterocytes, event that would be mediated by TGF-β secretion. IELs could be an essential component in the gut homeostasis after oral infection with this parasite. As a first attempt to study the immune response induced by this parasite in mice resistant to the acute infection, we have characterized the response elicited by the infection of the enterocyte cell line MODE-K (H-2^k)to evaluate its value as an in vitro model. Infection with T. gondii tachyzoites induced the activation of these cells, with the secretion of a cytokine and chemokine pattem with a strain-specific kinetics. Both unprimed and antigen-primed IELs isolated from CBA/J mice reduce chemokine expression by infected enterocytes. These IELs from naïve resistant mice, in contrast to the IELs from naïve susceptible mice, would produce endogenous anti-inflammatory cytokines that could result in an important component in the resistance to acute ileitis after infection. The second part of this thesis, has been focused on the study of the ability of specific parasite antigens in stimulating in vitro a systemic and mucosal response in orally infected susceptible (C57BL/6) and resistant (BALB/c [H-2^d) mice, in order to evaluate their possible use in the development of vaccines. For this purpose, we have used recombinant forms of ROPZ, GRA4 and TgPI antigens. rROP2 and rGRA4 induce a humoral response, and stimulated an in vitro cellular response in mesentheric lymph nodes and spleen cells, that differ with the strain of mice. In contrast, rTgPI elicits a low immune response during the infection. Remarkably, C57BL/6 strain produced high IFN-γ and low IL-5 levels, while in BALB/c mice the production of both cytokines resulted lower or null respectively. These antigens were also used in immunization assays of C57BL/6 and C3H mice in order to study their immune protective value against oral infection when combined with alum as adjuvant. rGRA4 induced partial protection in both strains of mouse, with a predominant Thl response, while rROP2 conferred partial protection only in C3H mice, with a stronger response compared to rGRA4. Immunizations of mice with a mix of rROP2 and rGRA4, and with a chimeric rROP2-rGRA4 protein, induce a similar partial protection to rGRA4 alone (C57BL/6) or rROP2 alone (C3H). Finally, the comparison of the immune protective value of rGRA4 combined with alum with a DNA vaccine system, resulted in similar partial protective values. In another study, rTgPI showed to reduce the brain cyst load in C3H and protect them against a lethal challenge, suggesting that this protein could elicit immunity during the acute phase of infection. These results suggest that these antigens could be considered as candidates for the development of a multi-antigenic vaccine based on alum as adjuvant. | - |
| dc.description | Fil:Martin, Valentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. | - |
| dc.format | application/pdf | - |
| dc.language | spa | - |
| dc.publisher | Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires | - |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | - |
| dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by/2.5/ar | - |
| dc.source.uri | http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3675_Martin | - |
| dc.title | Regulación de la respuesta inmune contra el toxoplasma gondii en la mucosa intestinal y análisis del valor inmunoprofiláctico de antígenos del parásito en el modelo murino | - |
| dc.title | Regulation of the inmune response in the intestinal mucosa against toxoplasma gondii and immunoprophilactic value of different parasite antigens in the murine model | - |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | - |
| dc.type | info:ar-repo/semantics/tesis doctoral | - |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | - |
| Aparece en las colecciones: | FCEN - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. UBA | |
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